SD胚鼠心脏成纤维细胞的原代培养及鉴定
沈俊1
袁平2
唐俊明3
杨建业3
李兴元3
张蕾3
赵继先2
张焕鑫2
薛仕珍2
冯怡2
王家宁1
1.442000 十堰，湖北医药学院附属人民医院心内科1病区; 442000 十堰，湖北医药学院附属人民医院临床医学研究所2.湖北医药学院附属人民医院心内科1病区, 十堰,4420003.湖北医药学院附属人民医院临床医学研究所, 十堰,442000
摘要：目的：建立适用于胚胎大鼠心脏成纤维细胞体外分离、培养及鉴定的技术方法。方法从SD孕19 d大鼠子宫中分离出胚胎鼠，再从胎鼠中分离出心脏，将心脏剪成肉糜状，用胰蛋白酶加上Ⅱ型、Ⅳ胶原酶联合消化法分离心脏成纤维细胞，再通过差速贴壁分离法分别收集、培养胚胎大鼠心脏成纤维细胞。在光学显微镜下观察心脏成纤维细胞形态特征的变化，用第2代心脏成纤维细胞用波形蛋白（vimentin）、结蛋白（desmin）、血管性血友病因子（vWF）、平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫荧光鉴定。结果差速贴壁法分离的心脏成纤维细胞原代培养120 min已经完全贴壁，培养第3~5代细胞生长良好，24 h心脏成纤维细胞波形蛋白免疫荧光鉴定纯度高达97%，培养2~3 d时心脏成纤维细胞增殖活力最强。结论差速贴壁分离法结合免疫荧光鉴定可分离胚胎大鼠心脏成纤维细胞，此种方法可得到产量大，纯度高，活力好的心脏成纤维细胞，适用于细胞水平上的心血管疾病发病机制的研究。
关键词：心脏成纤维细胞原代培养胚鼠鉴定
分类号：R322.1(人体形态学)
资助基金：国家自然科学基金(81270221)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1441-1444 )
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