MiR-499靶向HMGB1保护缺氧复氧心肌细胞损伤的分子机制探讨
周慧良1
甘受益1
李宾1
冯光瑞1
宋巧巧2
王淼1
1.437000 咸宁,咸宁市中心医院湖北科技学院附属第一医院心血管内科2.437000 咸宁,湖北科技学院内科教研室
摘要：目的 研究miR-499对缺氧复氧心肌细胞H9c2损伤的影响,并探讨其作用机制.方法 运用免疫印迹法(Western blot)检测缺氧复氧心肌细胞中高迁移率族蛋白1(HMGB1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、免抗人单克隆抗体(Bax)、caspase-3的蛋白表达;将H/R+miR-con组(转染miR-con)、H/R+miR-499组(转染miR-499 mimics)、miR-con组(转染miR-con)、miR-499组(转染miR-499 mimics)、anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、anti-miR-499组(转染anti-miR-499)、H/R+si-con组(转染si-con)、H/R+si-HMGB1组(转染si-HMGB1)、H/R+miR-499+Ctrl组(miR-499 mimics和pcDNA3.1共转染)、H/R+miR-499+HMGB1组(miR-499 mimics和pcDNA3.1-HMGB1共转染),均以脂质体法转染至H9c2细胞;实时荧光定量聚合酶链锁反应(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-499的表达;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性.结果 与NC组相比,H/R组细胞中HMGB1蛋白表达显著升高,miR-499表达显著降低(P<0.05);过表达miR-499或敲减HMGB1均可显著下调H/R H9c2细胞凋亡率,显著下调Bax、caspase-3的蛋白表达,上调Bcl-2的蛋白表达(P均<0.05);过表达HMGB1可逆转miR-499对H/R H9c2细胞凋亡的抑制作用.结论 MiR-499可抑制缺氧复氧心肌细胞H9c2凋亡,保护心肌细胞,其机制与靶向HMGB1有关,将可为心脏病的治疗提供新靶点.
关键词：miR-499高迁移率族蛋白1缺氧复氧心肌细胞凋亡
分类号：R542.2(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：国家科技支撑计划(2011BAI11B01)咸宁市中心医院湖北科技学院附属第一医院项目(2018XYA006)
论文发表日期：2019-12-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1456-1460 )
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