MicroRNA-9通过SIRT1/NF-κB通路促进TNF-α诱导心肌细胞损伤的机制研究
张朝华1
刘旭帮1
朱银川2
汤建民2
1.450000 郑州,郑州人民医院心血管内科2.450003 郑州,郑州大学第二附属医院心血管内科
摘要:目的 研究microRNA-9(miR-9)表达对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导心肌细胞(H9c2)损伤的影响,并探讨其分子机制.方法 使用CCK8试剂盒检测不同浓度(0、5、10、15和20μg/mL)TNF-α刺激H9c2或TNF-α作用于H9c2不同时间(0、12、24、48和72 h)后心肌细胞活性;向H9c2细胞中转染miR-9抑制剂(miR-9-inhibitor)以敲低miR-9的表达,通过实时荧光定量PCR法检测miR-9的表达,通过免疫印迹法检测SIRT1、p65及p-p65蛋白表达;荧光素酶基因报告系统用于检测miR-9与SIRT1靶向结合情况.结果 TNF-α以剂量和时间依赖性降低心肌细胞活性和促进miR-9在心肌细胞中的表达.与miR-9未敲低组相比,TNF-α刺激后,miR-9敲低组H9c2细胞活性更高(P<0.05).荧光素酶基因报告结果显示:miR-9靶向抑制SIRT1的表达,miR-9敲低可显著促进H9c2细胞中SIRT1蛋白的表达,显著降低p-p65/p65的比例(P均<0.05).结论 miR-9通过抑制SIRT1促进NF-κB通路激活.敲低miR-9可抑制NF-κB通路激活从而减轻TNF-α诱导的心肌细胞损伤,提高心肌细胞活性.
关键词:microRNA-9心肌细胞细胞活性肿瘤坏死因子α
分类号:R542.2(心脏、血管(循环系)疾病)
资助基金:河南省科技攻关计划项目(182102310166)
论文发表日期:2021-07-28
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 803-806 )
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