硫化氢调控PI3K/AKT介导的Nrf2/HO-1通路减轻缺氧/复氧HL-1心肌细胞损伤
郑晓斌
王朝
武海燕
姚冰琪
候书贤
030000 太原,山西省心血管病医院心内科
摘要：目的 探讨硫化氢(H2S)对缺氧/复氧(H/R)HL-1心肌细胞的保护作用,并分析其潜在机制.方法 首先,利用RNA干扰技术筛选并验证核因子红系2相关因子2(Nrf2)的选择性靶向小干扰RNA(siRNA).随后,建立H/R损伤的HL-1心肌细胞模型,并分为Control、H/R、H/R+硫氢化钠(NaHS)、H/R+NaHS+Nrf2 siRNA和H/R+Nrf2 siRNA五组进行相应处理.利用CCK-8法检测各组细胞活力,试剂盒测定H2S水平、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力,TUNEL染色观察各组细胞凋亡情况.最后,蛋白质印迹(Western blot)方法分析各组细胞中凋亡、炎症、Nrf2/血红素氧合酶-1(HO-1)通路及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路相关蛋白的表达.结果 成功筛选出针对Nrf2的有效siRNA片段,并验证了其对Nrf2表达的显著抑制作用,随后按分组要求转染Nrf2 siRNA.与Control组相比,H/R组细胞活力,H2S与SOD水平,B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、胞核Nrf-2、HO-1蛋白表达水平、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、磷酸化的糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)/GSK-3β比值均显著降低,MDA含量、细胞凋亡程度、剪切型半胱天冬酶-3(cle-capase-3)、胞浆Nrf-2、胞核酪氨酸蛋白激酶Fyn(Fyn)、白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达水平及磷酸化的核因子κB p65亚基(p-p65)/p65比值均显著升高(P＜0.05);NaHS预处理能够显著逆转上述变化,然而,转染Nrf2 siRNA则部分抵消了NaHS的保护作用.结论 H2S通过激活PI3K/AKT/GSK-3β信号通路增加Nrf2表达,减轻HL-1心肌细胞缺氧/复氧诱导的氧化应激损伤.
关键词：硫化氢缺血再灌注损伤氧化应激PI3K/AKT信号通路Nrf2/HO-1信号通路
分类号：R318.11(医用一般科学)
资助基金：山西省心血管病医院科研激励计划项目(XYS20210109)
论文发表日期：2025-01-27
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 32-38 )
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