CD36/Calpain-1/NLRP3轴调控的细胞焦亡途径及Th17/Treg炎症轴对血管平滑肌细胞的影响
吴立昊1
傅强2
詹中群3
刘辉3
栗洋3
李建平3
1.518101 深圳,南方医科大学深圳医院心血管内科;518101 深圳,南方医科大学深圳临床医学院;518106 深圳,深圳市光明区人民医院心血管内科2.518101 深圳,南方医科大学深圳医院心血管内科;518101 深圳,南方医科大学深圳临床医学院;518111 深圳,深圳大学附属华南医院心血管内科3.518106 深圳,深圳市光明区人民医院心血管内科
摘要：目的 探讨血小板反应蛋白受体(CD36)/钙激活中性蛋白酶(Calpain-1)/炎症小体NLRP3轴调控的细胞焦亡途径及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)炎症轴对血管平滑肌细胞(VSMC)的影响.方法 将大鼠血管平滑肌原代细胞以血小板源性生长因子(Platelet-derived growth factor,PDGF)处理24 h后建立PDGF诱导的VSMC模型,分为对照组(未转染的PDGF诱导VSMC)、Lv-pcDNA-CD36组(PDGF诱导的VSMC转染CD36过表达慢病毒载体)、Lv-si-CD36组(PDGF诱导的VSMC转染CD36沉默载体)、CD36空载体组(PDGF诱导的VSMC转染CD36空载体)、Lv-pcDNA-Calpain-1组(PDGF诱导的VSMC转染Calpain-1过表达慢病毒载体)、Lv-si-Calpain-1组(PDGF诱导的VSMC转染Calpain-1沉默载体)、Calpain-1空载体组(PDGF诱导的VSMC转染Calpain-1空载体)、Lv-pcDNA-NLRP3组(PDGF诱导的VSMC转染NLRP3过表达慢病毒载体)、Lv-si-NLRP3组(PDGF诱导的VSMC转染NLRP3沉默载体)、NLRP3空载体组(PDGF诱导的VSMC转染NLRP3空载体),采用qRT-PCR法检测VSMC细胞中CD36、Calpain-1、NLRP3的表达水平,分别采用MTT法、Transwell小室实验法、流式细胞仪法检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭、焦亡情况,采用Western-blot检测CD36、Calpain-1、NLRP3、Th17、Treg、细胞焦亡相关蛋白(GasderminD,GSDMD)的表达情况.结果 与CD36空载体组、Calpain-1空载体组、NLRP3空载体组分别比较,Lv-pcDNA-CD36组、Lv-pcDNA-Calpain-1组、Lv-pcDNA-NLRP3组的CD36 mRNA、Calpain-1 mRNA、NLRP3 mRNA表达水平均升高,而Lv-si-CD36组、Lv-si-Calpain-1组、Lv-si-NLRP3组的CD36 mRNA、Calpain-1 mRNA、NLRP3 mRNA表达水平均降低,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组、CD36空载体组、Calpain-1空载体组、NLRP3空载体组间各观察指标的表达水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组、CD36空载体组、Calpain-1空载体组、NLRP3空载体组分别比较,Lv-pcDNA-CD36组、Lv-pcDNA-Calpain-1组、Lv-pcDNA-NLRP3组的细胞增殖率、迁移数目、侵袭数目、焦亡率,以及CD36、Calpain-1、NLRP3、Th17、GSDMD蛋白表达水平均升高,而Treg蛋白的表达水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与Lv-pcDNA-CD36组、Lv-pcDNA-Calpain-1组、Lv-pcDNA-NLRP3组分别比较,Lv-si-CD36组、Lv-si-Calpain-1组、Lv-si-NLRP3组的细胞增殖率、迁移数目、侵袭数目、焦亡率,以及CD36、Calpain-1、NLRP3、Th17、GSDMD蛋白表达水平均降低,而Treg蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CD36/Calpain-1/NLRP3通路被激活可导致Th17/Treg炎症轴失调,进而引发VSMC焦亡.
关键词：血小板反应蛋白受体钙激活中性蛋白酶细胞焦亡平滑肌细胞辅助性T细胞17调节性T细胞大鼠
分类号：R543.1(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：广东省深圳市科技创新委员会基础研究专项(JCYJ20210324122606016)
论文发表日期：2025-04-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 437-444 )
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