中药紫菀AFLP技术参数的优化与分析
张淼1
张露勇2
张霞1
董丹丹1
1.解放军总医院,北京,1008532.后勤指挥学院门诊部,北京,100858
摘要：目的:探讨影响紫菀扩增片断长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)的各种因素,建立并优化紫菀AFl2反应体系,为研究紫菀分子品质性状的技术平台奠定基础.方法:CTAB法提取紫菀基因组DNA,分别用一步法和两步法进行酶切与连接,分别进行预扩增、选扩后,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染检测.结果:本研究建立了适用于紫菀的AFLP体系:用乙醇沉淀DNA,建立的模板不合PCR反应抑制剂及其他酶反应抑制剂,可被限制性内切酶MseI和EcoRI完全酶切;确定两步法进行酶切、连接,酶切时间为37℃3h,连接时间为16℃过夜,缓冲液选用NEB公司Buffer 2;选择性扩增后的银染显色在10℃以下.结论:本研究建立的反应体系适用于紫菀基因组DNA的AFLP研究.
关键词：紫菀扩增片断长度多态性银染
分类号：R917(药物分析)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 39-41 )
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