HPLC法测定血浆中尿嘧啶和二氢尿嘧啶的含量
蔡乐
叶敏
付强
朱珠
1.北京协和医学院,中国医学科学院北京协和医院药剂科,北京,1007302.北京协和医学院,中国医学科学院北京协和医院药剂科,北京,1007303.北京协和医学院,中国医学科学院北京协和医院药剂科,北京,1007304.北京协和医学院,中国医学科学院北京协和医院药剂科,北京,100730
摘要：目的:建立人血浆中内源性尿嘧啶(U)和二氢尿嘧啶(UH2)的HPLC测定方法,为通过UH2/U比值评价体内二氢嘧啶脱氢酶活性提供方法学基础.方法:采用Shim-pack CLC-ODS柱(6 mm×150 mm,5μm),以0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH值为4.0)为流动相,测定U的检测波长为260 nm,测定UH2的检测波长205 nm.以含3%牛血清白蛋白(BSA)的水溶液配制标准样品和质控样品.以溴尿嘧啶为内标,采用叔丁基甲醚/正丙醇(75:25)为提取溶剂进行两次提取,氮气吹干、复溶后进样分析.结果:U在5～200 μg·L-1的范围内线性良好(r=0.999 5,n=6),测定的批内变异RSD在1.73%～3.45%之间,批间变异RSD在1.76%～2.53%之间,回收率为96.15%～105.09%;UH2在10～400 μg·L-1的范围内线性良好(r=0.999 6,n=6),测定的批内变异RSD在3.67%～3.80%之间,批间变异RSD在3.40%～5.74%之间,回收率为101.51%～104.06%.结论:本方法灵敏度高,操作简便易行,为测定体内尿嘧啶和二氢尿嘧啶,进而评价二氢嘧啶脱氢酶活性提供方法学基础.
关键词：二氢嘧啶脱氢酶活性尿嘧啶二氢尿嘧啶高效液相色谱法
分类号：R917(药物分析)
资助基金：国家自然科学基金(30640092)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 10-13 )
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