人胃癌组织定向cDNA文库的构建
吴锟1
谢玉波2
王连振1
肖强1
1.广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,5300212.广西医科大学第一附属医院麻醉科,南宁,530021
摘要：目的快速构建成人胃癌组织cDNA文库.方法从人胃癌组织分离总RNA,以含有Sfi IB酶切位点的oligo(dT)引物合成第1链cDNA,以含Sfi IA酶切位点的SMART寡核苷酸为引物经LD-PCR扩增双链cDNA,双链cDNA经Sfi I(IA & IB)酶切,以CHROMA SPIN+TE-1000柱分级分离cDNA,收集符合需要的cDNA片段并纯化,随后将之与λTripIEx2载体连接经体外包装成噬菌体cDNA文库.结果经检测共获得2.73×106个重组子,重组率约为94%,插入片段大小平均为1.2 kb.结论用SMART方法构建的胃癌组织cDNA文库质量较高,为以后筛选胃癌相关基因奠定了基础.
关键词：cDNA文库胃癌定向克隆
分类号：R735.2(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81060201)广西壮族自治区科学研究与技术开发项目(10124001A-22)中国博士后科学基金特别资助项目(201003342)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 394-397 )
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