人CYB5R2基因真核表达载体的构建
余娜娜
杜春平
肖雪
侯波
黄光武
张哲
1.广西医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科,南宁,5300212.广西医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科,南宁,5300213.广西医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科,南宁,5300214.广西医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科,南宁,5300215.广西医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科,南宁,5300216.广西医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科,南宁,530021
摘要：目的 构建人CYB5R2基因真核表达载体,并观察其在人鼻咽癌细胞HONE1中的表达.方法 根据表达载体pCMV-Tag3A上的多克隆位点和CYB5R2基因CDS序列设计引物,应用RT-PCR从人睾丸cDNA中克隆出CYB5R2的CDS,并进行TA克隆.对经PCR、双酶切和双向测序验证正确的质粒,进行CDS目的 片段的回收,将其连接于pCMV-Tag3A载体的多克隆位点内构建真核载体,然后进行PCR、双酶切和双向测序验证.脂质体法转染鼻咽癌细胞HONE1细胞,荧光显微镜观察和RT-PCR验证该基因的表达.结果 PCR、双酶切和双向测序结果显示pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体构建成功,荧光显微镜和RT-PCR的结果显示该重组质粒在HONE1细胞中正确表达.结论 成功构建了pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体,并在鼻咽癌细胞HONE1中表达,为进一步验证其抑癌作用及探索其抑癌机制做准备.
关键词：鼻咽癌CYB5R2基因真核表达载体
分类号：R739.6(耳鼻咽喉肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(30960416)国家重点基础研究发展计划（973计划）(2011CB504301)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 695-699 )
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