siRNA介导的E2F-1基因沉默对胃癌细胞MGC803中Rb蛋白表达水平的影响
孔凡彪
王晓通
韦尉元
罗文
肖强
1.广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,5300212.广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,5300213.广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,5300214.广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,5300215.广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,530021
摘要：目的 应用RNA干扰技术研究E2F-1基因沉默在人胃癌MGC803细胞中对Rb蛋白表达的影响.方法 将重组质粒E2F-1-siRNA转染MGC803细胞,筛选稳定株,利用RT-PCR检测转染前后细胞E2F-1 mRNA表达水平,并通过蛋白免疫印记法(Western blot)检测各组细胞E2F-1蛋白的表达水平来验证质粒转入胃癌细胞的情况.采用Western blot检测三组细胞中总Rb蛋白和磷酸化Rb蛋白的表达情况,计算出非磷酸化Rb蛋白表达情况,统计各组间的差异.结果 重组质粒E2F-1-siRNA成功转入胃癌细胞中;有效抑制了E2F-1 mRNA的表达,E2F-1蛋白水平显著下降,与阴性对照组及未转染组相比分别降低了83.2%和84.6%,去磷酸化Rb蛋白分别增加了61.22%(P<0.05)和66.60%(P<0.05),差异有统计学意义.结论 沉默表达E2F-1基因后,可以有效降低Rb蛋白的水平,促进其活化形式去磷酸化Rb蛋白的产生.
关键词：E2F-1Rb蛋白去磷酸化siRNA胃癌
分类号：R735.2(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(30860273)广西壮族自治区科学研究与技术开发项目(10124001A-22)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 281-284 )
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