人KIM-1基因实时荧光定量PCR标准质粒的构建
陈治中1
卿吉琳2
阳文辉1
谭春艳1
宁乐平1
梁亮1
袁育林1
兰会华1
赵林1
1.广西壮族自治区人民医院检验科, 南宁,5300212.广西壮族自治区人民医院妇科, 南宁,530021
摘要：目的 制备用于人KIM-1基因mRNA实时荧光定量PCR检测的标准品质粒.方法 通过PCR扩增出目的片断,纯化PCR产物与pMD18-T载体连接,转化宿主菌E.coli DH5α,获得阳性克隆;通过PCR扩增鉴定和测序分析,确认重组质粒完整正确.提取重组质粒测定DNA浓度后,10倍倍比稀释,建立KIM-1质粒标准品.结果 KIM-1基因目的片段成功重组至pMD18-T载体上,扩增目的片段长度为131 bp,测序结果证实所构建的质粒序列与NCBI基因库KIM-1序列性一致.结论 成功构建KIM-1基因实时荧光定量PCR标准品质粒.
关键词：KIM-1基因实时荧光定量PCR重组质粒标准品
分类号：R346(基础医学)
资助基金：广西自然科学基金(2012GXNSFBA053084)广西卫计委科研课题(Z2013403)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 679-683 )
英文信息