利用CRISPR/Cas9技术构建FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株
张红1
胡晓霞2
洛若愚1
陈欢1
李梦如1
杨琅2
1.武汉大学人民医院妇科,湖北,4300002.广西壮族自治区人民医院妇科,南宁,530021
摘要：目的 利用CRISPR/Cas9技术敲除SiHa细胞中的卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)基因,构建FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株.方法 构建sgRNA-FSTL1重组质粒并包装成慢病毒.收集病毒液并感染SiHa细胞,使用嘌呤霉素筛选FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株;采用RT-qPCR和Western blot检测SiHa细胞稳定株FSTL1 mRNA和蛋白的表达情况.结果 FSTL1-sgRNA慢病毒构建成功并筛选出FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株;FSTL1的mRNA和蛋白表达水平在SiHa细胞稳定株中的表达量均比对照组低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 利用CRISPR/Cas9技术成功构建FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株.
关键词：CRISPR/Cas9卵泡抑素样蛋白1基因敲除SiHa细胞
分类号：R331(人体生理学)
资助基金：国家自然科学基金(81660434)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 842-846 )
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