水杨酸钠增强氧化应激介导耳蜗螺旋神经节神经元损伤作用的实验观察
祝小婷
黄佳琳
林晓宇
苏纪平
530021 南宁,广西医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科,广西区域性高发肿瘤早期防治研究重点实验室
摘要：目的 观察水杨酸钠(SS)作用大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(SGN)后,SGN中氧化应激水平的变化.方法 将6只SD大鼠随机分为对照组和SS组,每组3只.通过耳蜗器官培养48 h后,用5 mM SS处理48 h,对照组不予处理,采用免疫荧光染色技术定位耳蜗器官中活性氧自由基(ROS)的主要生成位置.将15只SD大鼠随机分成5组,即对照组、SS组、SS+N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组、阳性对照过氧化氢(H2 O2)组、H2 O2+NAC组,每组3只.通过急性分离SGN,原代培养48 h后分别用5 mM SS、5 mM SS联合100μM NAC、300μM H2 O2、300μM H2 O2联合100μM NAC处理48 h,对照组不予处理.采用荧光染色法检测并量化各组大鼠SGN中ROS荧光探针DCFH-DA的平均荧光强度;采用CCK8法检测SGN细胞存活率.结果 在耳蜗器官培养中,SS作用后,免疫荧光染色显示ROS荧光增强,并且主要在SGN中表达,而在其他细胞中荧光强度无明显变化.为进一步量化荧光强度,在原代培养SGN中加入5 mM SS处理后,荧光染色法显示ROS平均荧光强度较对照组升高(P<0.001),与H2O2组结果一致(P<0.0001).在加入ROS抑制剂NAC之后,ROS平均荧光强度较SS组下降(P<0.01).CCK8法结果显示,SS作用之后细胞存活率较对照组下降41.34％(P<0.01);在加入NAC之后,细胞存活率较SS组上升36.05％(P<0.01),与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).H2O2组细胞存活率较对照组下降52.31％(P<0.001),在加入NAC之后,细胞存活率较H2O2组上升34.73％(P<0.01).结论 SS增强SGN的氧化应激,并且导致了SGN损伤.氧化应激抑制剂NAC可以降低SGN的氧化应激,并且对SS致SGN损伤具有保护作用.
关键词：水杨酸钠耳蜗螺旋神经节神经元氧化应激免疫荧光耳蜗培养
分类号：R764.4(耳科学、耳疾病)
资助基金：国家自然科学基金(82260221)广西自然科学基金面上项目(2023GXNSFAA026288)
论文发表日期：2023-05-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 447-451 )
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