地榆皂苷Ⅰ对大鼠膝骨关节炎的作用机制研究
王哲纬1
周安远1
王勇麟1
裴晓敏1
钟秋玲1
杨渊2
1.广西医科大学再生医学与医用生物资源开发应用省部共建协同创新中心,南宁 5300212.广西医科大学再生医学与医用生物资源开发应用省部共建协同创新中心,南宁 530021;广西医大开元埌东医院骨科,南宁 530028
摘要：目的 研究地榆皂苷Ⅰ对大鼠膝骨关节炎的作用机制.方法 选择SD雄性乳鼠8只,提取乳鼠软骨细胞,采用CCK-8实验检测细胞增殖率以确定最佳药物浓度.将软骨细胞随机分为对照组、炎症组和治疗组,对照组在完全培养基中进行培养,炎症组在含有10 μg/mL白细胞介素-1β(IL-1β)的培养基中培养,治疗组在含有10 μg/mL IL-1β和最佳浓度地榆皂苷Ⅰ的培养基中培养.采用Calcein-AM/PI染色观察各组软骨细胞生长情况.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测各组软骨细胞中白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶13(MMP13)mRNA相对表达量.取8周龄左右的SD雄性大鼠24只随机分为对照组、炎症组和治疗组,每组8只,对炎症组和治疗组建立骨关节炎模型,建模完成4周后,炎症组和对照组的关节腔内注射等体积生理盐水,治疗组的关节腔内注射100 pL最佳浓度的地榆皂苷Ⅰ溶液,1次/周,连续给药4周.采用HE染色和番红O-固绿染色观察各组膝关节组织结构.采用免疫组化染色观察各组膝关节组织中IL-6、MMP13蛋白表达情况.结果 CCK-8实验结果显示,各实验浓度均未表现明显细胞毒性,当地榆皂苷Ⅰ的浓度为20 mg/L时,软骨细胞增殖率最高.Calcein-AM/PI染色结果显示,炎症组和治疗组细胞增殖率低于对照组,治疗组细胞增殖率高于炎症组,差异有统计学意义(P＜0.05).RT-qPCR检测结果显示,炎症组和治疗组IL-6、MMP13 mRNA相对表达量高于对照组,治疗组IL-6、MMP13 mRNA相对表达量低于炎症组,差异有统计学意义(P＜0.05).HE染色和番红O-固绿染色结果显示,对照组的膝关节组织结构比炎症组和治疗组完整,与炎症组相比,治疗组膝关节组织损伤有所减轻.免疫组化染色结果显示,炎症组IL-6、MMP13蛋白表达水平最高,治疗组IL-6、MMP13蛋白表达水平高于对照组.结论 地榆皂苷Ⅰ可通过维持软骨细胞活力、降低炎症因子的释放以及减少软骨细胞外基质(ECM)的降解发挥抗炎作用,对膝骨关节炎有一定的药用潜力.
关键词：地榆皂苷Ⅰ骨关节炎抗炎白细胞介素-6基质金属蛋白酶13膝骨关节炎大鼠模型
分类号：R684.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
资助基金：国家重点研发计划(2020YFB1313801)国家自然科学基金(82360425)南宁市青秀区科技计划项目(2020014)
论文发表日期：2024-06-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 639-644 )
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