miR-155调控巨噬细胞极化并经外泌体介导足细胞损伤的作用机制研究
徐璐瑶1
张洁1
林栩2
1.右江民族医学院研究生学院,百色 533000;右江民族医学院附属医院肾内科,百色 5330002.右江民族医学院附属医院肾内科,百色 533000;广西免疫相关性疾病医学科研基础保障重点实验室,百色 533000
摘要：目的 探讨miR-155调控巨噬细胞极化并经外泌体介导足细胞损伤的作用机制.方法 选择巨噬细胞 RAW264.7 和肾小球足细胞 MPC5 进行实验.将 miR-155 mimics、miR-155 mimics NC、miR-155 inhibitor和miR-155 inhibitor NC慢病毒转染至RAW264.7细胞,构建miR-155过表达/低表达巨噬细胞系及其对照,分离巨噬细胞外泌体.采用流式细胞术检测各组巨噬细胞M1/M2表型比值.采用Transwell法将RAW264.7细胞与MPC5细胞进行共培养,分别于共培养12 h、24 h后采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测巨噬细胞miR-155表达水平;采用Western blot法检测巨噬细胞IL-6、IL-10表达水平,以及肾小球足细胞synaptoporin和nephrin表达水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肾小球足细胞IL-1β、IL-10表达水平;采用TUNEL染色法检测肾小球足细胞凋亡情况.结果 成功构建miR-155 过表达/低表达巨噬细胞系并分离其外泌体.miR-155过表达可诱导巨噬细胞极化为M1型,抑制miR-155可诱导巨噬细胞极化为M2型.在miR-155 mimics慢病毒转染至巨噬细胞24 h后,其miR-155表达水平显著增加(P＜0.05),并上调IL-6的表达水平(P＜0.05),抑制IL-10的表达水平(P＜0.05),经Transwell共培养使足细胞synaptoporin、nephrin表达水平下降(P＜0.05),IL-1β表达水平升高(P＜0.05),并促进足细胞发生凋亡.而转染miR-155 inhibitor慢病毒至巨噬细胞后所得结果趋势与miR-155 mimics相反.RT-qPCR检测结果显示,miR-155 mimics组巨噬细胞外泌体中miR-155水平显著升高(P＜0.05),miR-155 inhibitor组巨噬细胞外泌体中miR-155水平显著降低(P＜0.05).结论 miR-155过表达可诱导巨噬细胞极化为M1型,并通过外泌体介导引发足细胞损伤,而下调miR-155表达则逆转这一作用.
关键词：miR-155巨噬细胞外泌体足细胞损伤凋亡炎症因子
分类号：R692.6(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
资助基金：国家自然科学基金(82060133)国家自然科学基金(81860131)广西自然科学基金项目(2017GXNSFAA198288)广西自然科学基金项目(2019GXNSFDA24504)
论文发表日期：2024-08-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 852-859 )
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