银杏叶提取物EGb761改善结直肠癌细胞对顺铂敏感性的机制研究
宁绮婷
陈形梅
黄珊珮
朱丽叶
丘新泽
刘诗权
广西医科大学第二附属医院消化内科,南宁 530007
摘要：目的 探讨银杏叶提取物EGb761改善结直肠癌(CRC)细胞对顺铂(DDP)敏感性的机制.方法 选择人CRC细胞RKO进行实验,根据不同的干预方法设置对照组、EGb761组、DDP组及EGb761+DDP组.采用CCK-8法检测EGb761、DDP对RKO细胞活力的影响.通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot实验检测鞘氨醇激酶1(SphK1)和凋亡相关因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3)、B淋巴细胞瘤2(BCL2)的表达.采用流式细胞术实验检测RKO细胞的凋亡水平.通过慢病毒转染构建SphK1低表达的RKO细胞株,分析敲低SphK1和EGb761干预对凋亡相关因子表达水平的影响.在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索银杏叶的主要活性成分,通过分子对接探讨它们与SphK1的结合能力.结果 CCK-8实验结果显示,EGb761可抑制RKO细胞的增殖,并增强RKO细胞对DDP的敏感性.RT-qPCR实验和Western blot实验结果显示,与对照组相比,EGb761组、DDP组和EGb761+DDP组Caspase 3的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),且EGb761+DDP组的表达水平较EGb761组、DDP组更高(P＜0.05).与对照组相比,EGb761组、DDP组和EGb761+DDP组BCL2的mRNA和蛋白表达水平显著下降(P＜0.05),且EGb761+DDP组的表达水平较EGb761组、DDP组更低(P＜0.05).流式细胞术实验结果显示,与对照组相比,EGb761组、DDP组和EGb761+DDP组的凋亡率显著升高(P＜0.05),且EGb761+DDP组的凋亡率较EGb761组、DDP组更高(P＜0.05).EGb761可抑制RKO细胞SphK1蛋白表达,且作用效果呈剂量依赖性(P＜0.05).经慢病毒转染法成功构建SphK1低表达的RKO细胞株,敲低SphK1能显著提升RKO细胞对DDP的敏感性,而EGb761增强RKO细胞对DDP敏感性及促进凋亡的作用依赖于对SphK1的抑制.分子对接结果表明,银杏叶主要活性成分白果内酯、毛茛素、芝麻素、(+)-儿茶素、(-)-儿茶素和异鼠李亭与SphK1具有较强的结合能力.结论 银杏叶提取物EGb761通过抑制SphK1表达促进细胞凋亡,从而增强CRC细胞对DDP的敏感性.
关键词：银杏叶提取物结直肠癌鞘氨醇激酶1顺铂化疗敏感性
分类号：R735.3(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(82260579)广西中医药适宜技术开发与推广项目(GZSY21-56)广西研究生教育创新计划项目(YCSW2023240)
论文发表日期：2025-04-30
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 389-395 )
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