剪接因子DDX3Y下调IL-6/JAK/STAT3信号通路促进男性胃癌细胞增殖和类器官生长的机制研究
周雅静
李东宝
王鹏博
段开鹏
董超
李炜康
孙小童
徐呈祥
周进
苏州大学附属第一医院普外科,苏州 215006
摘要：目的 分析剪接因子DDX3Y下调IL-6/JAK/STAT3信号通路促进男性胃癌细胞增殖和类器官生长的机制.方法 通过生物信息学方法分析DDX3Y在胃癌组织和癌旁组织中的表达水平以及DDX3Y表达情况与患者预后的关系.收集苏州大学附属第一医院收治的男性胃癌患者的胃癌组织和癌旁组织(距离胃癌组织＞5 cm)进行免疫组化染色.对人胃永生化黏膜上皮细胞GES-1以及男性来源胃癌细胞SNU-1、NUGC-3、KATOⅢ、MKN74、HGC-27、NCI-N87进行培养.采用Western blot法检测DDX3Y在不同细胞系中的表达水平.通过慢病毒转染SNU-1细胞和HGC-27细胞,分别构建DDX3Y高表达/低表达的细胞(OE-DDX3Y/shDDX3Y),进行EdU细胞增殖实验.利用男性胃癌患者的胃癌组织构建类器官,并通过慢病毒转染进一步构建DDX3Y高表达/低表达的类器官,分析抑制IL-6/JAK/STAT3信号通路对类器官直径及活力的影响.使用RBPmap在线网站预测DDX3Y与IL-6前体mRNA结合的可能性.结果 癌旁组织中DDX3Y mRNA表达水平显著高于胃癌组织(P＜0.05).DDX3Y mRNA高表达患者的生存预后显著优于低表达患者(log-rank检验:x2=7.856,P=0.005).与GES-1细胞相比,DDX3Y蛋白在HGC-27细胞中显著高表达(P＜0.05);相较于HGC-27细胞,SNU-1细胞中DDX3Y蛋白表达量较低(P＜0.05).在SNU-1细胞中,OE-DDX3Y组的DDX3Y蛋白表达量显著高于高表达对照组(P＜0.05),OE-DDX3Y组EdU染色阳性细胞比例显著低于高表达对照组(P＜0.05).在HGC-27细胞中,shDDX3Y-1组的DDX3Y蛋白表达量显著低于低表达对照组(P＜0.05),shDDX3Y组EdU染色阳性细胞比例显著高于低表达对照组(P＜0.05).相较于高表达对照组,OE-DDX3Y组类器官直径显著减小(P＜0.05),活力显著降低(P＜0.05),抑制IL-6/JAK/STAT3信号通路后类器官直径进一步减小(P＜0.05),活力进一步降低(P＜0.05).相较于低表达对照组,shDDX3Y组类器官直径显著增大(P＜0.05),活力显著增加(P＜0.05),抑制IL-6/JAK/STAT3信号通路后类器官直径显著减小(P＜0.05),活力显著降低(P＜0.05).RBPmap在线网站预测结果提示DDX3Y很可能与IL-6的前体mRNA发生结合(Z-score＞3,结合信号显著).结论 剪接因子DDX3Y下调促进男性胃癌细胞增殖和类器官生长,其调控IL-6的可变剪接并可进一步通过影响IL-6/JAK/STAT3信号通路发挥促进肿瘤进展的作用.
关键词：DDX3Y肿瘤细胞增殖可变剪接IL-6/JAK/STAT3信号通路胃癌性别差异
分类号：R735.2(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(82372887)国家自然科学基金(82403045)江苏省自然科学基金(BK20221242)江苏省自然科学基金(BK20240372)苏州市科教兴卫青年科技项目(KJXW2023005)苏州大学附属第一医院自然科学基金博习培育计划项目(BXQN2023027)
论文发表日期：2025-06-30
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 642-651 )
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