靶向GLI1基因增强卵巢癌细胞化疗敏感性的实验研究
巩向玲1
宋彩霞2
刘世松1
王平3
1.青岛,青岛经济技术开发区妇幼保健院,妇产科,山东,2665552.青岛,胶南市人民医院高压氧治疗中心,山东,2664003.成都,四川大学华西医院妇产科,四川,317000
摘要:目的 探讨载体表达的小干扰RNA(siRNA)影响卵巢癌耐药细胞株GLI1基因的表达,促进凋亡并逆转其顺铂耐药的可行性.方法 体外构建GLI1小发夹状RNA(shRNA)的表达质粒,脂质体法介导将其转染人SKOV3/DDP细胞.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测GLI1 mRNA的表达;使用免疫细胞化学法(ICC)检测GLI1蛋白的表达;使用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定各组细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测其对卵巢癌细胞凋亡的影响.结果 GLI1 shRNA转染组细胞GLI1 mRNA的表达与其他两组相比明显减弱(P<0.01),GLI1蛋白表达明显下调(P<0.01);顺铂敏感性比正常对照组提高了约2.5倍;流式细胞仪检测结果显示:顺铂作用24 h后,特异性转染组细胞周期分布发生明显改变,G0/G1期细胞比例增多,而S期细胞比例减少,凋亡率显著升高.结论 针对GLI1合成的siRNA能够有效地抑制GLI1 mRNA和蛋白的表达,促进卵巢癌耐药细胞凋亡并能恢复其对顺铂的敏感性.应用.RNAi技术,能够逆转卵巢癌细胞对化疗药物的耐药性.
关键词:卵巢癌GLI1基因RNA干扰逆转耐药
资助基金:四川省教育厅科研项目(07LF0098)
论文发表日期:2010-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 81-85 )
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中国肿瘤外科杂志

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ISSN:1674-4136
年,卷(期):2010,2(2)
所属栏目:论著