幽门螺杆菌诱导增强子RNA调控MYC促进胃癌的作用及机制研究
石韫1
高赟2
颜财旺2
彭锐1
李刚1
1.210009 江苏 南京,南京医科大学附属肿瘤医院 普外科2.211166 江苏 南京,南京医科大学公共卫生学院
摘要：目的 探究幽门螺杆菌(H.pylori)诱导增强子RNA(eRNA)的表达,eRNA对原癌基因MYC的调控作用及eRNA调控MYC的分子机制,探索eRNA在胃癌发生和发展中的作用.方法 根据胃上皮细胞GES-1与H.pylori共培养后测得的RNA-seq筛选差异基因MYC,通过ATAC-seq、CUTTag确定MYC的eRNA(eMYC).采用RT-qPCR检测GES-1感染H.pylori前后eMYC和MYC的表达量.使用Western blot检测蛋白含量变化.敲低eMYC后采用RT-qPCR检测MYC的表达量来检验eMYC对MYC的调控作用.采用CUTRUN探究eMYC调控MYC的机制.在胃癌细胞系MKN1中使用RT-qPCR检测eMYC和MYC在感染H.pylori后表达水平的变化,使用EdU检测细胞增殖能力,使用流式细胞术检测细胞凋亡.结果 原癌基因MYC在H.pylori感染后表达增加(FDR＜1 × 10-300),MYC基因上下游1MB以内存在染色质开放区域(FDR＜0.05)..CUTTag结果显示,H3K27ac、H3K4me1和RNA聚合酶Ⅱ在这个区域呈现高信号.RT-qPCR结果显示,eMYC和MYC的表达水平在GES-1细胞感染H.pylori后都升高(P＜0.001),MYC蛋白含量升高.敲低eMYC后,MYC的表达水平(P＜0.001)和蛋白含量降低.CUTRUN实验结果显示,敲低eMYC后,eMYC转录位置基因组区域富集到的H3K27ac和BRD4含量降低(P＜0.01).MKN1感染H.pylori后eMYC和MYC的表达水平升高(P＜0.01),敲低eMYC后细胞增殖能力降低(P＜0.001),细胞凋亡增加(P＜0.05).结论 H.pylori感染诱导eMYC的表达,通过影响H3K27ac修饰以及与BRD4相互作用促进原癌基因MYC的转录,在胃癌的发生中有重要作用.eMYC促进胃癌细胞增殖、抑制细胞凋亡,与胃癌的进展有关.
关键词：胃癌幽门螺杆菌增强子RNAMYC
资助基金：江苏省肿瘤医院科技发展基金项目(ZL202101)国家自然科学基金(82203226)江苏省肿瘤医院优才计划(2017YYCJH-08)中国博士后科学基金(2022M721410)
论文发表日期：2024-10-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 465-474 )
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