肿瘤相关巨噬细胞内SHP-2过表达通过激活PI3K/mTOR通路加速血管新生促进乳腺癌进展的研究
何广
冀东
宋翠萍
窦亚林
曹贺菊
066000 河北 秦皇岛,秦皇岛市第四医院 肿瘤内科
摘要：目的 探究肿瘤相关巨噬细胞内蛋白酪氨酸磷酸酶-2(SHP-2)过表达能否通过激活胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路加速血管新生从而促进乳腺癌进展.方法 运用LipofectamineTM2000 在乳腺癌细胞系(MCF-7)中建立SHP-2过表达细胞.将 20 只BALB/C裸鼠随机分为两组:①SHP-2-NC组、②SHP-2+PHPS1 抑制剂组,SHP-2+PHPS1 抑制剂组加入SHP2 特异性抑制剂(PHPS1).将上述分组好的细胞溶液注射到裸鼠右侧腋窝处皮下构建肿瘤模型,每天测量并记录肿瘤大小.使用PI3K磷酸肽激活剂(740Y-P)对转染后的人类单核白血球细胞系(THP-1)细胞进行处理,分组:③SHP-2-NC+740Y-P激动剂组、④SHP-2+PHPS1 抑制剂+740Y-P 激动剂组,SHP-2-NC+740Y-P激动剂组和SHP-2+PHPS1 抑制剂+740Y-P激动剂组均加入 740Y-P激动剂.免疫印迹分别检测MCF-7细胞p-SHP-2、p-PI3K、p-mTOR、VEGF、COX-2、MMP2 和MMP9 蛋白表达水平.使用成管实验检测各组HUVEC细胞的成管能力.使用细胞划痕实验、Transwell实验检测各组MCF-7 细胞迁移侵袭能力.结果 动物实验结果表明,与SHP-2-NC组相比,SHP-2+PHPS1 抑制剂组肿瘤体积明显减小(P＜0.05).人乳腺癌细胞(MCF-7)细胞Western blot检测结果显示,与SHP-2-NC组相比,SHP-2+PHPS1 抑制剂组p-SHP-2、p-PI3K、p-mTOR、VEGF、COX-2、MMP2 和 MMP9 蛋白水平显著降低(P＜0.05).与SHP-2-NC+740Y-P激动剂组相比,SHP-2+PHPS1 抑制剂+740Y-P激动剂组p-SHP-2 蛋白水平显著降低(P＜0.05),p-PI3K、p-mTOR、血管内皮生长因子(VEGF)、环氧化酶(COX-2)、基质金属蛋白酶 2(MMP2)和基质金属蛋白酶 9(MMP9)蛋白表达无明显差异(P＞0.05).与①②组比较,③④组p-PI3K、p-mTOR、VEGF、COX-2、MMP2 和MMP9 蛋白水平明显升高(P＜0.05).HUVEC细胞成管实验结果显示,与SHP-2-NC组相比,SHP-2+PHPS1 抑制剂组管腔形成数明显降低(P＜0.05).SHP-2-NC+740Y-P激动剂组和SHP-2+PHPS1 抑制剂+740Y-P激动剂组相比,管腔形成数无明显差异(P＞0.05).与①②组比较,③④组管腔形成数显著上升(P＜0.05).在 4 组MCF-7细胞中,SHP-2-NC组细胞迁移侵袭能力大于SHP-2+PHPS1 抑制剂组(P＜0.05),SHP-2-NC+740Y-P激动剂组和SHP-2+PHPS1 抑制剂+740Y-P激动剂组相比差异无统计学意义(P＞0.05).③④组细胞迁移侵袭能力大于①②组(P＜0.05).结论 肿瘤相关巨噬细胞内SHP-2过表达可通过激活PI3K/mTOR通路加速血管新生从而促进乳腺癌进展.
关键词：肿瘤相关巨噬细胞蛋白酪氨酸磷酸酶-2PI3K/mTOR血管新生乳腺癌
论文发表日期：2025-06-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 291-298 )
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