应用反向线点杂交技术鉴定临床常见曲霉属和毛霉目真菌
赵作涛
李丽丽
王晓阳
万喆
陈伟
李若瑜
1.北京大学第一医院皮肤性病科,北京大学真菌和真菌病研究中心,北京 1000342.北京大学第一医院皮肤性病科,北京大学真菌和真菌病研究中心,北京 1000343.北京大学第一医院皮肤性病科,北京大学真菌和真菌病研究中心,北京 1000344.北京大学第一医院皮肤性病科,北京大学真菌和真菌病研究中心,北京 1000345.北京大学第一医院皮肤性病科,北京大学真菌和真菌病研究中心,北京 1000346.北京大学第一医院皮肤性病科,北京大学真菌和真菌病研究中心,北京 100034
摘要：目的 应用反向线点杂交技术(reverse line blot hybridization,RLB)快速鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌.方法 收集我院真菌和真菌病研究中心保存的5种曲霉菌(烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、构巢曲霉)和7种毛霉目真菌(冻土毛霉菌、总状毛霉菌、卷枝毛霉菌、少根根霉、小孢根霉、微小根毛霉、伞状犁头霉),共计98株菌株.利用真菌通用引物ITS1和ITS4对菌株进行PCR扩增,用12个真菌种特异性探针与扩增后产物进行反向线点杂交.将RLB结果与真菌传统形态学鉴定结果、ITS区DNA测序结果进行比较.结果 RLB可以正确鉴定98株实验菌株,与形态学方法和ITS区测序方法鉴定结果100％一致,种特异性探针之间未见交叉杂交,显示出该方法的高度敏感性和特异性.8株阴性对照菌株(白念珠菌、茄病镰刀菌、尖端赛多孢、马尔尼菲青霉、疣状瓶霉、棒曲霉、日本曲霉以及雅致小克银汉霉),使用RLB方法无法鉴定.通过烟曲霉基因组DNA浓度10倍倍比稀释法验证RLB的敏感性为1.8×10-3 ng/μL.结论 RLB技术为实验室早期快速诊断、鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌提供参考.
关键词：曲霉毛霉PCR反向线点杂交
分类号：R379.6(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)R379.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：卫生部公益基金(200802026)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 261-266 )
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