简并PCR结合RACE技术克隆申克孢子丝菌未知过氧化氢酶基因
王晓慧1
刘伟2
李若瑜2
1.厦门大学附属中山医院皮肤科,厦门,3610042.北京大学真菌和真菌病研究中心北京大学第一医院皮肤科真菌室,北京,100034
摘要:目的 克隆孢子丝菌未知过氧化氢酶基因,命名为Sscat基因.方法 根据生物信息库中7种已知真菌过氧化氢酶氨基酸序列的高度保守区域设计简并引物,PCR扩增获得部分Sscat基因cDNA片段,随后应用RACE技术分别扩增其3’端和5’端未知序列.结果 Sscat基因cDNA序列全长1746 bp,其中包括5’端121 bp的非编码区、1500 bp的编码区和109 bp的3’端非编码区.该基因编码499个氨基酸,分子量为56.07 kDa,其氨基酸序列与其他真菌过氧化氢酶氨基酸高度同源,其中与米曲霉、黑曲霉同源性分别为66.3%和56.6%,Sscat基因为申克孢子丝菌过氧化氢酶cDNA.结论 简并PCR结合RACE技术成功克隆了孢子丝菌未知过氧化氢酶基因.
关键词:孢子丝菌过氧化氢酶简并PCR快速cDNA末端扩增
分类号:R379.9(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
论文发表日期:2011-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 271-275 )
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中国真菌学杂志

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ISSN:1673-3827
年,卷(期):2011,6(5)
所属栏目:论著