新生隐球菌MIS1基因的siRNA表达载体的构建及鉴定
李秀丽1
田媛2
史玉玲1
顾俊瑛1
李晓建1
刘至昱1
马越娥1
高飞1
王茠茠1
1.上海第十人民医院皮肤科,上海,2000722.第二军医大学药学院生化药学教研室,上海,200433
摘要：目的 构建靶向新生隐球菌MIS1基因的siRNA重组表达载体质粒,并进行鉴定.方法 根据GenBank的MIS1基因序列,按照载体要求设计单链引物,克隆到空载体psilencer4.I-CMV neo中,经过LiAc化学法将重组质粒转染到新生隐球菌细胞中并用G418筛选,利用real time PCR鉴定阳性细胞的MIS1基因水平.结果 重组表达质粒Psilencer4,1-CMV-si-MIS1经PCR、双酶切及测序鉴定,结果证明重组表达载体构建成功,其能在mRNA水平显著抑制MIS1的表达.结论 已成功构建新生隐球菌MIS1基因的siRNA表达载体,为深入研究MIsl在隐球菌相关疾病的发生及发展中的作用提供了技术手段.
关键词：新生隐球菌RNA干扰MIS1
分类号：R379.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 17-19,23 )
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