新生隐球菌总 RNA 抽提方法的实验研究
徐赤宇1
刘翠杰1
吴建华2
仇芸3
赵瑾3
朱红梅3
温海3
1.济南军区总院皮肤科,济南,2500312.第二军医大学附属长海医院皮肤科,上海,2004333.第二军医大学附属长征医院皮肤科,上海,200003
摘要：目的 探讨快速获取高质量的新生隐球菌总RNA的实验方法.方法 选取新生隐球菌的荚膜株、荚膜缺陷株,分别设计采用4种方法提取总RNA:酸洗玻璃珠法、液氮研磨法、异硫氰酸胍一步法、冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法.用紫外线分光光度计测量其OD260、0D280的值,并且进行琼脂糖凝胶电泳,同时应用定量PCR法鉴定RNA质量.结果 酸洗玻璃珠法、液氮研磨法、异硫氰酸胍一步法、冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法的RNA产量分别为0.2μg/105细胞、0.4.μg/105细胞、0.1 μg/105细胞、0.6 μg/105细胞.结论 冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法提取的RNA均一性和完整性最好,是简便、快捷地提取具有荚膜和细胞壁双重屏障的新生隐球菌RNA的理想方法.
关键词：新生隐球菌RNA真菌液氮Yeast RNA kit酸洗玻璃珠法
分类号：R379.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：中国博士后科学基金(第四十七批)(20100471802)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 156-160 )
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