电穿孔介导马尔尼菲青霉转化体系的建立和优化
陈阳霞1
顾桉菁2
梁宇恒1
马团1
席丽艳1
1.中山大学孙逸仙纪念医院,广州,5101202.贵阳医学院基础医学院,贵阳,550004
摘要：目的 建立和优化马尔尼菲青霉电穿孔转化体系,为其基因功能研究提供良好平台.方法 直接使用马尔尼菲青霉缺陷株SPM4(pyrG-,niaD-)萌发孢子进行电穿孔转化,并通过改变孢子龄、孢子萌发时间、质粒浓度、电场强度等影响因素对体系进行优化.结果 适合SPM4电穿孔转化条件为:孢子龄为6d,孢子萌发时间为4h,电场强度为5 kV/cm.上述条件下分别使用1 μg环状或线性化质粒DNA转化SPM4,平均可得到21个和13个转化子.结论 马尔尼菲青霉电穿孔转化效率高,重复性好,针对SPM4萌发孢子,环状质粒较线性化质粒电穿孔转化效率高.
关键词：马尔尼菲青霉萌发孢子电穿孔
分类号：R379.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(81171545)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 12-15 )
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