多聚泛素UBI4低表达对新生隐球菌生长与毒力的功能影响
孟云芳1
周兆婧1
杨雅骊1
赵静宇2
张超1
法振宗1
桑军军1
方伟1
廖万清1
1.上海长征医院皮肤病与真菌病研究所 全军真菌病重点实验室 第二军医大学附属长征医院皮肤科,上海,2000032.上海长征医院皮肤病与真菌病研究所 全军真菌病重点实验室 第二军医大学附属长征医院皮肤科，上海200003; 上海市皮肤病医院，上海200050
摘要：目的：构建新生隐球菌的多聚泛素UBI4低表达菌株，检测UBI4低表达对新生隐球菌生长和毒力的功能影响。方法采用融合PCR方法，扩增含有UBI4基因的片段，将其与含有组蛋白启动子的质粒融合。通过基因枪将重组质粒片段转化入新生隐球菌，应用PCR筛选、DNA序列测序以及实时定量PCR方法对基因重建株进行鉴定与验证。检测多聚泛素UBI4低表达菌株对多种应激耐受力、生长曲线以及对蜡蛾感染的毒力影响。结果成功构建了新生隐球菌多聚泛素UBI4低表达。表型检测结果提示：较之标准株，UBI4低表达株生长速率下降，对高温、H2 O2和NO应激以及多种抗真菌药物敏感性显著增强；同时，UBI4下调表达后隐球菌对蜡蛾的毒力显著下调。结论我们的研究初步证实多聚泛素蛋白UBI4对新生隐球菌的生长增殖、应激应答以及感染能力具有重要的调控作用，为后续深入探讨新生隐球菌泛素系统的功能机制奠定基础。
关键词：新生隐球菌多聚泛素致病机制应激应答
分类号：R379.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(2013CB531601)上海市自然科学基金(12ZR1454400)上海市自然科学基金(12JC1411000)上海市医学真菌分子生物学实验室基金(14DZ2272900)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 16-21 )
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