长引物P CR法构建白念珠菌SCH9-MYC融合菌
徐秋荣1
吕权真2
隋雪3
王晓娟4
阎澜2
姜远英5
1.福建中医药大学药学院中药学教研室,福州,3501082.第二军医大学药学院新药研究中心,上海,2004333.第二军医大学药学院新药研究中心，上海200433; 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院，沈阳1100164.第二军医大学药学院新药研究中心，上海200433; 中国药科大学药学院，南京2100095.福建中医药大学药学院中药学教研室，福州 350108; 第二军医大学药学院新药研究中心，上海200433
摘要：目的：构建白念珠菌SCH9?MYC融合菌。方法运用长引物PCR扩增含有MYC标签和ARG4筛选标记的质粒序列，采用醋酸锂转染法将质粒序列同源重组到白念珠菌SN152的SCH9基因开放阅读框的C末端，在SC?Leu?选择性培养基上筛选阳性克隆，抽取阳性克隆基因组进行PCR验证，将验证为阳性的转染子进行生长曲线测定、spot assay、菌丝诱导实验，进一步筛选出表型正常的融合菌。结果通过PCR验证鉴定出3株融合菌构建正确，通过生长曲线测定、spot assay、菌丝诱导实验筛选出两株表型正常的融合菌菌株。结论运用长引物PCR扩增方法同源重组可以正确构建白念珠菌SCH9?MYC融合菌菌株。
关键词：白念珠菌MYCSCH9长引物
分类号：R379.4(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(81470158)国家自然科学基金(81330083)国家重点基础研究发展计划（973计划）(2013CB531602)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 129-133 )
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