孢子丝菌病快速诊断方法的探究
吴永卓1
刘晓明2
张振颖2
1.昆明医科大学第二附属医院,昆明 650000;大连医科大学,大连1160002.香港大学深圳医院,深圳 518000;大连医科大学,大连116000
摘要：目的 研究申克孢子丝菌DNA提取方法;探索申克孢子丝茵的种特异性引物,运用聚合酶链反应方法鉴定申克孢子丝菌;从而为临床孢子丝茵病的分子诊断奠定基础.方法 用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁提取孢子丝菌的基因组DNA;根据申克孢子丝茵钙调蛋白基因序列设计一对寡核苷酸引物,分别对52株申克孢子丝菌及3种6株普通真茵的基因组DNA进行PCR扩增.结果 用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁成功提取出孢子丝菌的基因组DNA.特异性引物对52株申克孢子丝菌可扩增出一条约430 bp的片段,而对念珠菌、曲霉、黑霉基因组DNA扩增结果均为阴性.结论 用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁提取孢子丝菌基因组DNA与传统的CTAB法相比不仅操作更简便,而且避免了液氮研磨过程中难于避免的污染.运用我们所设计的特异性引物,结合PCR方法对申克孢子丝菌进行分子鉴定,结果显示不仅该引物对申克孢子丝菌特异、敏感而且该方法简便、快捷;可用于申克孢子丝菌病的临床诊断.
关键词：申克孢子丝茵基因组DNA提取聚合酶链反应DNA引物钙调蛋白基因
分类号：R756.6(皮肤病学与性病学)
论文发表日期：2020-02-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 22-25 )
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