犬小孢子菌FSH1基因干扰载体的构建及验证
张芙蓉1
郭春梅2
吴英1
谭灿3
杨国玲4
1.大连市友谊医院皮肤科,大连 1160012.大连医科大学,大连 1160443.成都市第二人民医院皮肤科,成都 6100174.大连医科大学附属第一医院,大连 116011
摘要：目的 为了构建犬小孢子菌FSH1基因的R N A干扰重组质粒,并验证其干扰效率.方法 以犬小孢子菌FSH1基因全长cDNA为模板,利用PCR技术扩增FSH1基因,将质粒pUC-PUT进行双酶切使其线性化,插入FSH1正向及反向干扰序列,获得中间载体pUC-PFUFT,将其及质粒pCB-309双酶切后连接,构建干扰载体pCB309-PFULFT.将其转化根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)EHA105,获得犬小孢子菌FSH1基因RNA干扰的转化体系.用实时定量PCR方法对犬小孢子菌FSH1基因干扰前后表达量进行鉴定.结果 成功构建了FSH1基因的干扰载体pCB309-PFULFT,获得FSH1基因的干扰转化子;犬小孢子菌野生株干扰后FSH1基因m R N A相对表达量较干扰前下降约70％,标准株下降约60％.结论 本试验成功构建了犬小孢子菌FSH1基因的干扰载体,为后续研究FSH1基因的功能及在头癣中的发病机制奠定了基础.
关键词：犬小孢子菌RNA干扰根癌农杆菌丝氨酸水解酶1头癣
分类号：R379.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(81071330)
论文发表日期：2020-12-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 354-358 )
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