运用抑制性消减杂交技术构建糖尿病肾阳虚证DNA消减文库
崔丽娟1
赵晓山2
罗仁1
董晓蕾3
周琳4
孙晓敏1
1.南方医科大学南方医院,中医科,广东,广州,5105152.广东省中医院,内二科,广东,广州,5101053.南京军区总医院,中医科,江苏,南京,2100024.南方医科大学南方医院,内分泌科,广东,广州,510515
摘要：目的:运用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)构建糖尿病(Diabetic mellitus,DM)肾阳虚证DNA消减文库.方法:选择汉族中医辨证为肾阳虚证的DM患者以及正常人做对照组,进行正向和反向消减杂交.用Rsa Ⅰ酶切用硅胶法抽提基因组DNA成大小不等的片段,分别连接两种不同的接头,进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将PCR产物与U/A载体连接,经蓝白斑筛选及菌液PCR筛选出阳性重组质粒,构建DM肾阳虚证DNA消减文库.结果:用SSH方法筛选出DM肾阳虚证的差异DNA片段,经克隆及PCR筛选出阳性重组质粒,从而成功地构建了DM肾阳虚证的DNA消减文库.结论:SSH技术能够快速有效地分离差异DNA片段以构建DM肾阳虚证DNA消减文库,为进一步筛选和克隆DM肾阳虚证相关基因奠定了基础.
关键词：糖尿病肾阳虚证抑制性消减杂交基因组消减文库
分类号：R2-031(中国医学理论)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(30271573,30472118)国家中医药局科研项目(02-03JP43)广东省科技计划(2003B31712)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 192-194 )
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