基于Wnt/β-catenin通路探讨当归补血汤防治化疗后骨髓造血细胞衰老的机制

白莹; 刘俊岑; 王佳佳; 贾富霞; 王文娟

摘要：目的研究当归补血汤(Danggui Buxue decoction,DBD)对化疗后骨髓造血细胞衰老的改善作用与机制.方法将 60只雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组,模型对照组(100 mg/kg),阳性对照组(30 μg/kg)和DBD高、中、低剂量组(24 g/kg、12 g/kg、6 g/kg),每组 10 只.阳性对照组皮下注射给予重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte colony stimulating factor,rhG-CSF),DBD组按照体重灌胃,给药 5 d后各组腹腔注射环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)3 d,建立化疗后骨髓细胞衰老模型,造模完成后,继续各类药物干预 2d.药物干预结束后检测小鼠外周血常规;称重器官;苏木素伊红(htoxylin eosin,HE)染色观察髂骨结构;ELISA测骨髓造血细胞SA-β-半乳糖苷酶(SA-β-galactosidase,SA-β-Gal)含量;Western blot法测定骨髓造血细胞中p21、p53、β-catenin、GSK-3β蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法测定骨髓造血细胞p21、p53、β-catenin、GSK-3β、c-myc mRNA表达.结果与空白对照组相比较,模型对照组白细胞数、淋巴细胞数和中性粒细胞数下降(P<0.05);HE染色中骨髓中造血细胞数减少,造血组织间隙较大;骨髓造血细胞SA-β-Gal含量上升(P<0.01),p21、p53 蛋白及mRNA表达上调(P<0.05);β-catenin蛋白及mRNA表达上调(P<0.01),c-myc mRNA表达上调(P<0.05).与模型对照组相比较,DBD高剂量组白细胞数上升(P<0.05),SA-β-Gal含量下降(P<0.05),HE染色中骨髓中造血细胞数增多,造血组织间隙减小,p21、p53、β-catenin蛋白及mRNA表达均下调(P<0.05),GSK-3β mRNA表达上调(P<0.01);DBD中剂量组SA-β-Gal含量下降(P<0.01),DBD 中剂量组 β-catenin 蛋白及 mRNA 表达下调(P<0.05);DBD 低剂量组 GSK-3β mRNA表达上调(P<0.05);β-catenin mRNA表达下调(P<0.01).结论 DBD能保护化疗过程中的骨髓造血细胞并缓解其衰老,提示其机制与抑制Wnt/β-catenin通路有关.