基于分子对接探讨葛根素调节VEGF/Ang/Tie2信号通路改善缺氧条件下视网膜新生血管生成的分子机制
丁珊
刘春梦
吴美初
邢尧
张富文
成都中医药大学眼科学院,成都 610075
摘要：目的 基于分子对接技术及体外实验验证,探究葛根素对氯化钴(cobalt chloride,CoCl2)诱导的缺氧条件下视网膜新生血管(retinal neovascularization,RNV)形成过程中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)/血管生成素(angiopoietin,Ang)/Tie2通路的调控作用.方法 采用细胞增殖及毒性检测试剂(cell counting kit,CCK)-8筛选出合适的CoCl2缺氧造模浓度及葛根素干预大鼠视网膜微血管内皮细胞(rat retinal microvascular endothelial cells,rRMECs)的浓度.应用细胞增殖实验、划痕实验和小管成形实验观察葛根素对缺氧状态下rRMECs增殖、迁移和成管的影响.之后使用分子对接技术评估葛根素与VEGF/Ang/Tie2通路相关蛋白靶点的结合潜力,并通过RT-qPCR对分子对接结果进行验证.结果 根据CCK-8结果,将实验分为对照组、模型组、葛根素高剂量组、葛根素低剂量组.模型组CoCl2的浓度为200μmol/L,葛根素高、低剂量组的干预浓度分别为40μmol/L和10μmol/L.体外研究发现葛根素可降低缺氧条件下rRMECs增殖率、迁移率及成管节点数与交叉点数.分子对接结果显示,葛根素与VEGF/Ang/Tie2通路上的关键蛋白有良好的结合潜力.此外,RT-qPCR结果显示葛根素能显著降低缺氧条件下rRMECs中Ang2、HIF-1 D、VEGF-A、VE-PTP的mRNA表达,同时上调Ang1、Tie2、VE-cadherin的mRNA表达,并且具有一定的剂量效应关系.结论 葛根素可以抑制缺氧条件下视网膜微血管内皮细胞的增殖、迁移、血管生成过程,具有一定的抑制RNV作用,具体机制可能与葛根素调节VEGF/Ang/Tie2通路有关.
关键词：视网膜新生血管葛根素分子对接缺氧
分类号：R285(中药学)
资助基金：四川省自然科学基金面上项目(2023NSFSC0690)四川省中医药管理局科学技术研究专项课题(2022CP3581)成都中医药大学杏林学者学科人才项目(YXRC2018013)
论文发表日期：2024-12-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 2060-2068 )
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