DAPT对离体培养的基底膜的影响
李新新1
杨仕明2
郭维维2
邢光前3
1.南京医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科 南京210029;解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科 解放军耳鼻咽喉研究所 北京 1008532.解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科 解放军耳鼻咽喉研究所 北京 1008533.南京医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科 南京210029
摘要:目的 观察新生大鼠体外培养的基底膜在Notch通路被阻断的情况下,毛细胞的生长变化情况.方法 取新生(P0) SD大鼠耳蜗基底膜进行体外培养,采用自身对照的方式,实验组基底膜加入含Notch通路阻断剂DAPT(终浓度为5μM)的高糖培养基,对照组不加DAPT,培养5天(P5)后,用激光共聚焦显微镜观察毛细胞的生长变化情况.P0时采用逆转录PCR检测Notch通路的存在与否,P5时采用实时定量PCR检测阻断Notch通路后下游基因的变化情况.结果 实验组经DAPT的处理后有毛细胞的增多,逆转录PCR证实了出生第一天时尚有Notch通路的存在,实时定量PCR证实DAPT处理后Hes1和Hes5表达降低,而Math1表达升高.结论 新生大鼠中Notch通路活性尚存,加入Notch通路阻断剂DAPT后,抑制毛细胞生成的Hes1和Hes5表达降低,而促毛细胞生成的Math1表达升高,并且,通过形态学观察和统计学分析发现毛细胞数目增多.
关键词:DAPTNotch通路内耳毛细胞大鼠RT-PCR
分类号:R394.26(医学遗传学)
资助基金:国家重点基础研究发展计划(973计划)(2011CBA01000)国家高技术研究发展计划(863计划)(2007AA02Z 150)国家自然科学基金(30730040)国家自然科学基金(30871398)国家科技支撑计划(2008BAI50B08,2007BAI18B12,2007BAI 18B14)江苏省科教兴卫工程项目(RC2007064)
论文发表日期:2011-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 249-253 )
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