TMEM16A对衰老耳蜗血管纹周细胞凋亡的作用
李雪蕊1
冯子奕1
陈龙1
徐少然1
邓双1
马克涛1
司军强1
李丽2
1.石河子大学医学院生理学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室,石河子8320002.嘉兴学院医学院生理学教研室,嘉兴314000
摘要:目的 原代培养豚鼠耳蜗血管纹毛细血管周细胞(PCs),探讨TMEM16A在耳蜗血管纹PCs上的表达变化及其对衰老耳蜗血管纹PCs凋亡的影响.方法 原代培养耳蜗血管纹PCs并鉴定;运用β-半乳糖苷酶染色确定细胞衰老模型;全细胞膜片钳技术记录PCs上CaCCs的电流变化;免疫荧光检测耳蜗血管纹PCs上TMEM16A的表达变化;Western Blot技术检测TMEM16A和凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果 原代培养的耳蜗血管纹PCs阳性率在95%以上,确定第13代耳蜗血管纹PCs为衰老组.全细胞膜片钳记录到衰老组较年轻组PCs上CaCCs电流密度增大.与年轻组PCs相比,衰老组周细胞上TMEM16A、Cas-pase-3、Bax表达升高,Bcl-2表达下降,细胞凋亡率明显升高.衰老组给予30μmol/L T16Ainh-A01干预24 h后,Caspase-3、Bax表达下降,Bcl-2表达升高,细胞凋亡率明显下降.结论 衰老的耳蜗血管纹PCs凋亡增多且TMEM16A表达增加,TMEM16A特异性阻断剂T16Ainh-A01可以减少衰老耳蜗血管纹PCs的凋亡.提示TMEM16A可能参与衰老耳蜗血管纹PCs的凋亡.
关键词:血管纹周细胞TMEM16A凋亡原代培养膜片钳
分类号:R764(耳科学、耳疾病)
资助基金:国家自然科学基金(81960188;81560175)
论文发表日期:2021-02-28
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 113-119 )
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