腺相关病毒Anc80L65转染成年小鼠椭圆囊的实验研究
王国鹏
贺璐
郭婧滢
陈钟壡
龚树生
首都医科大学附属北京友谊医院耳鼻咽喉头颈外科 100050 北京
摘要：目的 探索腺相关病毒载体Anc80L65对正常和不同程度损伤的成年小鼠椭圆囊前庭感觉上皮的转染特性.方法 将6周龄小鼠分为以下三组.1)正常对照组:将携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的Anc80L65病毒液(Anc80L65-GFP),经后半规管注射途径导入小鼠内耳;2)中度损伤组:行水平半规管注射导入150μg链霉素,术后2周通过后半规管注射导入Anc80L65-GFP病毒液;3)重度损伤组:行水平半规管注射导入400μg链霉素,术后2周行后半规管注射导入Anc80L65-GFP病毒液.导入病毒后4周取椭圆囊行免疫荧光染色,观察椭圆囊的形态及GFP在椭圆囊感觉上皮的表达情况.结果 正常对照组:Anc80L65-GFP病毒液注射后,正常椭圆囊毛细胞无明显缺失,纤毛形态正常,GFP广泛分布于整个感觉上皮区域.中度损伤组:椭圆囊前庭毛细胞数量明显减少,支持细胞仍存活,GFP广泛分布于整个感觉上皮区域.高倍镜下见前庭支持细胞和毛细胞被转染.重度损伤组:椭圆囊的前庭毛细胞和支持细胞均被损伤,前庭感觉上皮演化为细胞大小不一、形态不规则的扁平上皮结构.在前庭扁平上皮中,GFP阳性细胞数量与对照组及中度损伤组相比明显减少.结论 Anc80L65能高效转染正常和中度损伤后的成年小鼠椭圆囊前庭感觉上皮,但对重度损伤后形成的前庭扁平上皮的转染效率较低,这可能与其细胞属性发生改变有关.在未来的前庭基因治疗研究中,须根据前庭感觉上皮的不同损伤程度来选择合适的载体.
关键词：腺相关病毒前庭毛细胞支持细胞基因转染
分类号：R764(耳科学、耳疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81771016)北京市自然科学基金(7212022)
论文发表日期：2022-02-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 21-25 )
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