质膜钙泵1和质膜钙泵3在发育期大鼠耳蜗毛细胞的动态表达
陈请国
褚汉启
陈金
刘云
杜智会
周良强
华中科技大学同济医学院附属同济医院耳鼻咽喉头颈外科(武汉 430030)
摘要：目的 探究质膜钙泵1(plasma membrane calcium pumps1,PMCA1)和PMCA3在发育期大鼠耳蜗毛细胞的动态表达.方法 麻醉后取出生2(P2)、6(P6)、13(P13)、21(P21)d的大鼠耳蜗,固定后分离出基底膜做铺片,通过定量免疫荧光标记法检测PMCA1和PMCA3在基底膜底回、中回、顶回外毛细胞(outer hair cells,OHCs)和内毛细胞(inner hair cells,IHCs)的表达部位和表达水平.用共聚焦显微镜捕获免疫荧光图片,使用Adobe Photoshop软件测量PMCA1和PMCA3的荧光强度,绘制年龄相关性表达曲线.结果 在整个发育过程中,PMCA1在OHCs纤毛(OHCs hair bundle,OHCs-HB)、IHCs纤毛(IHCs hair bundle,IHCs-HB)均无表达.在出生早期,PMCA1在OHCs胞体(OHCs cell body,OHCs-CB)、IHCs胞体(IHCs cell body,IHCs-CB)侧膜的表达逐渐增强,P6后在OHCs-CB侧膜的表达逐渐下降,到成年期维持在微弱的水平;PMCA1在IHCs-CB侧膜的表达在P13达到高峰,维持在此水平进入成年期.在整个发育阶段,PMCA3在OHCs-HB、IHCs-HB均无表达,在出生6 d内的OHCs-CB、IHCs-CB侧膜均有较强的表达.P13后,PMCA3在OHCs-CB侧膜表达几乎消失,在IHCs-CB侧膜和表皮板下方项圈的表达虽然下降,但仍维持在一定水平进入成年期.P2、P6,PMCA1、PMCA3在OHCs-CB、IHCs-CB侧膜表达水平在基底膜底回最高,其次为中回、顶回,P13后,差异性消失.结论 在大鼠发育过程中,PMCA1、PMCA3在毛细胞不同部位呈现动态表达,PMCA1、PMCA3在OHCs-HB、IHCs-HB均无表达,在出生早期的OHCs-CB侧膜有短暂的表达,在整个时期的IHCs-CB侧膜持续表达.由于毛细胞主要依靠PMCA来调控胞内Ca2+水平,因此推测PMCA1和PMCA3在毛细胞的差异性表达与PMCA泵在毛细胞不同区域发挥着特殊的功能有关.
关键词：质膜钙泵1质膜钙泵3大鼠耳蜗毛细胞动态表达
资助基金：国家自然科学基金(81300827)湖北省自然科学基金面上项目(2023AFB686)湖北省自然科学基金面上项目(2022CFB282)
论文发表日期：2025-04-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 261-266 )
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