IPTG诱导变形链球菌葡糖基转移酶可溶性表达及活性初步测定
汪林1
储冰峰2
王成龙3
刘洪臣1
邵宁生4
杨光4
董洁4
刘玉4
1.解放军总医院口腔医学研究所,北京,1008532.解放军总医院老年口腔病科,北京,1008533.解放军总医院口腔内科,北京,1008534.军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850
摘要：目的:提取变形链球菌GS5葡糖基转移酶GTF(glucosyltransferase)催化活性区(CAT)的基因,利用IPTG诱导后获得可溶性表达,并检测活性.方法:利用PCR技术克隆CAT的基因片段,通过蛋白重组融合表达技术使其在大肠杆菌BL21中表达,利用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导含有质粒pET32-NusA-CAT的大肠杆菌,SDS-PAGE电泳进行检测;采用蒽酮硫酸法验证活性.结果:成功将CAT基因连入大肠杆菌BL21,获得可溶性的融合蛋白表达;并且融合蛋白具有生物学活性.结论:IPTG成功诱导克隆的变形链球菌葡糖基转移酶催化活性区基因并获得可溶性融合蛋白的表达,具有生物学活性.
关键词：变形链球菌葡糖基转移酶大肠杆菌
分类号：R780.1(口腔疾病的预防与口腔卫生)
资助基金：国家自然科学基金(30440059)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 94-97 )
英文信息