环状RNA EPB41L2通过调控微小RNA-1270/GNAI3轴抑制口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移及侵袭
杨凤1
缪克红1
兰玉燕2
林方梁1
孙黎波3
1.643000,自贡市第一人民医院口腔科2.646000 泸州,西南医科大学口腔修复科3.646000,泸州市人民医院口腔科
摘要：目的 环状RNA(circular RNA,circRNA)与口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的进展密切相关,现探讨circRNA EPB41L2调控OSCC细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制.方法 将细胞分为7组:HOK组(正常培养的口腔上皮细胞)、SCC-9组(正常培养的SCC-9细胞)、CAL-27组(正常培养的CAL-27细胞)、oe NC 组(转染空载 pcDNA3.4 至 CAL-27 细胞)、oe EPB41L2 组(转染 pcDNA3.4-EPB41L2 至 CAL-27 细胞)、oe EPB41L2+mimics NC组(转染pcDNA3.4-EPB41L2及mimics NC至CAL-27细胞)、oe EPB41L2+miR mimics组(转染pcDNA3.4-EPB41L2及miR-1270 mimics至CAL-27细胞).通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测circRNA EPB41L2、miR-1270及GNAI3 mRNA在各组细胞中的表达,通过CCK-8检测各组细胞活力,通过流式细胞术检测各组细胞凋亡率,通过集落形成实验检测各组细胞增殖能力,通过细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,通过Transwell实验检测各组细胞侵袭数量,通过Western blot检测GNAI3蛋白在各组细胞中的表达,通过RNA pull-down实验、RNA免疫共沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)实验、双荧光素酶报告实验验证miR-1270与circRNA EPB41L2的靶向结合关系,通过双荧光素酶报告实验验证miR-1270与GNAI3的靶向结合关系.结果 与HOK组比较,SCC-9组、CAL-27组中circRNA EPB41L2表达显著下降(P＜0.01),且在CAL-27组中表达水平最低,因此选取CAL-27细胞作为后续研究对象.与oe NC组比较,oe-circRNA EPB41L2组CAL-27细胞活力、增殖能力、划痕愈合率、侵袭数量显著下降,细胞凋亡率显著上升(P＜0.001).与oe EPB41L2+mimics NC组比较,oe EPB41L2+miR mimics组CAL-27细胞增殖能力、划痕愈合率、侵袭数量显著上升,细胞凋亡率显著下降(P＜0.001).与HOK组比较,CAL-27组细胞miR-1270表达显著升高(P＜0.001);与oe NC组比较,oe EPB41L2组细胞miR-1270表达显著下降(P＜0.001).与HOK组比较,CAL-27组细胞GNAI3 mRNA和蛋白表达显著下降(P＜0.001);与oe NC组比较,oe EPB41L2组细胞GNAI3 mRNA和蛋白表达显著上升(P＜0.001);与oe EPB41L2+mimics NC组比较,oe EPB41L2+miR mimics组GNAI3 mRNA和蛋白表达显著下降(P＜0.05).RNA pull-down实验、RIP实验、双荧光素酶报告实验共同证实miR-1270与circRNA EPB41L2靶向结合.双荧光素酶报告实验证实miR-1270与GNAI3靶向结合.结论 circRNA EPB41L2通过调控miR-1270/GNAI3轴抑制OSCC细胞的增殖、迁移和侵袭.
关键词：口腔鳞状细胞癌环状RNA EPB41L2微小RNA-1270GNAI3增殖迁移
分类号：R739.8(口腔、颌面部肿瘤)
论文发表日期：2025-01-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 4-11 )
英文信息