血管内皮生长因子真核表达载体的构建及其在培养鼠心肌细胞中的表达
郝亚荣
李建军
李庚山
1.武汉大学人民医院老年病科,湖北,武汉,4300602.武汉大学人民医院老年病科,湖北,武汉,4300603.武汉大学人民医院老年病科,湖北,武汉,430060
摘要：目的构建血管内皮生长因子(VEGF165)真核表达载体,并检测其在鼠心肌细胞中的表达.方法应用DNA重组方法,将编码hVEGF165全长cDNA克隆于真核表达载体pCR3中,构建pCR3.hVEEGF165真核表达载体,使用脂质体包裹的方法将真核表达载体pCR3.hVEGF165转染至培养鼠心肌细胞中,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Southern blot、免疫组织化学染色、酶联免疫吸附测定法检测VEGF165基因在心肌细胞中的表达和分泌.结果将构建好的真核表达载体pCR3.hVEGF165转染心肌细胞后,VEGFmRNA及蛋白水平明显增高.结论成功构建了真核表达载体pCR3.hVEGF165,其转染心肌细胞后能够获得较高水平的VEGF蛋白.
关键词：血管内皮生长因子基因表达DNA重组转染聚合酶链反应
分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：湖北省科技攻关项目(96291101)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 46-49 )
英文信息