RNA干扰技术建立细丝蛋白表达下调的血管平滑肌细胞模型
朱光明
张微微
陈冰璞
李娟
1.北京军区总医院,北京,1007002.北京军区总医院,北京,1007003.北京军区总医院,北京,1007004.北京军区总医院,北京,100700
摘要：目的 利用RNA干扰(RNAi)技术使细丝蛋白(FLN)mRNA表达降低,抑制FLN在血管平滑肌细胞(VSMC)中的生成.方法 采用RNAi技术建立FLN表达下调VSMC模型,设计3条可诱发FLN mRNA表达基因沉默的小分子RNA(SiRNA)片段,根据构建质粒载体并转染VSMC的不同,建立7-1、7-2、7-3组和正常对照组、空白载体组5组转染细胞模型,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白标记物的表达并鉴定转染效率,荧光定量PCR鉴定FLN mRNA抑制效果.Western blot检测FLN蛋白的表达.结果 设计的3条SiRNA均可有效抑制FLN mRNA的表达.其中7-1和7-2组抑制效果最明显,可达60%以上.3组FLN/肌动蛋白(actin)的比值与正常对照组或空白载体组相比较均明显下降.结论 利用RNAi抑制FLN在VSMC中的生成,有可能减少病理状态下收缩表型VSMC向合成表型转化.有可能达到从基因水平上预防或治疗动脉粥样硬化的作用.
关键词：肌细胞平滑肌RNA 干扰转染信号传导质粒
分类号：R543(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：国家自然科学基金(30470609)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 50-52 )
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