沉默脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因对脂肪细胞合成甘油三酯及脂联素分泌的影响
吴洁
钟敏
邹瑾
1.南华大学附属第一医院心内科,衡阳,4210012.南华大学附属第一医院心内科,衡阳,4210013.南华大学附属第一医院心内科,衡阳,421001
摘要:目的 应用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对3T3-L1脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)的microRNA表达载体,研究沉默A-FABP基因的表达对脂肪细胞合成甘油三酯及脂联素分泌的影响.方法 构建靶向A-FABP基因的microRNA表达载体转染3T3-L1脂肪细胞后,RT PCR及Western blot法检测A-FABP mRNA 及蛋白表达.建立A-FABP基因沉默细胞模型,0.5 mmol/L游离脂肪酸和成熟脂肪细胞共孵育24 h,分为对照组、脂肪酸组、RNAi组、RNAi+脂肪酸组.ELISA法分别检测甘油三酯及脂联素水平,RT-PCR法检测脂肪细胞A-FABP及脂联素mRNA的表达.结果 microRNA表达载体特染脂肪细胞后,能显著抑制A-FABP mRNA和蛋白表达.随着脂肪酸浓度的升高,脂肪细胞甘油三酯合成明显增加,脂联素分泌明显减少(P<0.05).与对照组和脂肪酸组比较,RNAi组和RNAi+脂肪酸组甘油三酯水平明显降低,脂联素水平明显升高,脂联素mRNA表达明显上调(P<0.05).结论 阻断A-FABP基因有可能成为防治动脉粥样硬化及糖尿病的新靶点.
关键词:RNA干扰脂细胞脂肪酸结合蛋白质类甘油三酯类脂联素基因表达微RNAs
资助基金:衡阳市科学技术发展计划项目(2009KJ64)
论文发表日期:2012-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 464-467 )
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