慢病毒转染基质金属蛋白酶9对星形胶质细胞水通道蛋白4表达的研究
李燕华
韦俊杰
李晓峰
范秉林
陈志
李吕力
1.广西壮族自治区人民医院神经内科, 南宁,5300212.广西壮族自治区人民医院神经内科, 南宁,5300213.广西壮族自治区人民医院神经内科, 南宁,5300214.广西壮族自治区人民医院神经内科, 南宁,5300215.广西壮族自治区人民医院神经内科, 南宁,5300216.广西壮族自治区人民医院神经内科, 南宁,530021
摘要:目的 观察慢病毒转染基质金属蛋白酶9 (matrix metalloproteinase 9,MMP-9)后,星形胶质细胞水通道蛋白4 (aquaporin,AQP4)表达变化,探讨慢病毒转染星形胶质细胞的可行性.方法 取出生2d的SD乳鼠大脑皮质进行星形胶质细胞纯化培养,利用携带绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基因的慢病毒转染细胞,通过倒置荧光显微镜观察细胞内GFP显影效果.将细胞分为正常组、阴性对照组[转染小干扰RNA(siRNA)]和MMP-9慢病毒组(转染MMP-9 siRNA),用RT-PCR检测MMP-9 mRNA和AQP4 mRNA表达变化.结果 MMP-9慢病毒组细胞增殖较快,第3天细胞内GFP在倒置荧光显微镜显影>90%,到达80%左右转染率的最佳感染条件为复感染指数=30~50.正常组MMP-9 mRNA和AQP4 mRNA表达为0.982±0.169和1.095±0.035,阴性对照组分别为1.104±0.271,1.112±0.026,MMP-9慢病毒组表达分别为0.552±0.197和0.652±0.042.正常组与阴性对照组MMP-9 mRNA和AQP4 mRNA表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);与阴性对照组和正常组比较,MMP-9慢病毒组细胞MMP-9 mRNA和AQP4 mRNA表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05).结论 慢病毒转染星形胶质细胞MMP-9可介导AQP4表达下调,为进一步利用星形胶质细胞进行缺血性脑水肿基因调节的研究提供实验依据.
关键词:慢病毒感染转染基质金属蛋白酶9星形细胞水通道蛋白质4脑水肿
资助基金:国家自然科学基金(81560210)广西自然科学基金(2016GXNSFAA380165)
论文发表日期:2019-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 1199-1202 )
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