转录因子Tbx18对升主动脉平滑肌细胞的重编程作用
王凤媛
唐艳红
王晞
赵庆彦
王腾
黄从新
430060,武汉大学人民医院心内科武汉大学心血管病研究所心血管病湖北省重点实验室
摘要：目的 探讨转录因子Tbx18腺病毒载体在体外转染升主动脉平滑肌细胞的重编程作用.方法 采用组织块贴壁法培养升主动脉平滑肌细胞,4～7 d后在光学显微镜下观察细胞形态,细胞传代后随机分为空白组、绿色荧光蛋白(GFP)组、Tbx18组,Tbx18组转染携带Tbx18和GFP腺病毒,GFP组转染等量GFP腺病毒,空白组不转染病毒.转染4d后通过RT-qPCR和Western blotting检测3组相关转录因子环核苷酸门控离子通道蛋白亚型4(HCN4)、Tbx3、NKx2.5和心肌细胞特异性标志物心肌肌钙蛋白I(cTnI)表达;通过免疫荧光技术检测Tbx18组及GFP组HCN4蛋白表达.结果 与GFP组和空白组比较,Tbx18组HCN4、Tbx3和cTnI mRNA和蛋白表达明显上调,NKx2.5蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(0.135±0.033 vs 0.291±0.104、0.344±0.067,P＜0.05).免疫荧光结果显示,倒置荧光显微镜下Tbx18组HCN4蛋白发出红色荧光,并且与细胞转染的绿色荧光和细胞核蓝色荧光大致重合,而GFP组几乎无红色荧光发出.结论 Tbx18腺病毒载体在体外能够将升主动脉平滑肌细胞重编程为起搏样细胞.
关键词：转录因子腺病毒科主动脉肌细胞平滑肌转染肌钙蛋白I
资助基金：湖北省技术创新专项(2016ACA153)中央高校基本科研业务费专项资金(2042015kf0229)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1309-1313 )
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