微小RNA let-7c通过抑制血小板源性生长因子受体表达促进小鼠血管平滑肌细胞衰老
崔星钢1
余逸杰1
姜瑜1
李波1
赵倩茹2
朱灿宏2
仲威1
卞石惠2
1.212001 镇江,江苏大学附属医院心内科2.江苏大学附属人民医院老年科
摘要：目的 探讨微小 RNA(miRNA)let-7 c参与小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)衰老的机制.方法 选择 C57BL/6J 小鼠 40 只,将小鼠分为对照组、老年组各 20 只,通过qPCR技术检测小鼠血清及主动脉血管中let-7c miRNA表达水平.从C57BL/6J 小鼠主动脉中提取并原代培养 VSMC.通过博来霉素体外诱导细胞衰老模型.使用 Li-po2000 脂质体转染法过表达或抑制细胞 let-7c miRNA表达.将 VSMC分为阴性对照(NC)组、博来霉素组、博来霉素+let-7c过表达组、博来霉素+let-7c抑制组,通过衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色评估组织或细胞衰老水平.将 VSMC分为控制组、血小板衍生生长因子(PDGF)组、PDGF+let-7c 过表达组,采用 Western blot 检测各组细胞蛋白表达.将 VSMC分为空白组、let-7c过表达组、突变组、突变+let-7c 过表达组,使用双荧光素酶报告基因验证 let-7c靶点.结果 老年组小鼠主动脉和血清中let-7c miRNA相对表达水平显著高于对照组(6.37±0.81 vs 1.00±0.00,P<0.05;5.23±0.44 vs 1.00±0.00,P<0.05).博来霉素+let-7c 过表达组中 SA-β-gal 染色阳性比例较博来霉素组增多,而博来霉素+let-7c 抑制组中 SA-β-gal 染色阳性比例较博来霉素组明显减少(P<0.05).与PDGF+let-7c过表达组比较,PDGF组血清反应因子表达显著升高,α平滑肌肌动蛋白及平滑肌肌球蛋白重链表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).双荧光素酶实验显示,let-7c 过表达组中荧光素酶活性水平较空白组显著下降(0.43±0.05 vs 1.00±0.00,P<0.05).结论 miRNA let-7c 通过抑制 PDGF 受体表达促进小鼠VSMC衰老.
关键词：循环微RNA血小板源性生长因子肌细胞平滑肌
资助基金：国家自然科学基金(82000261)江苏省高等学校自然科学研究项目(20KJB320013)江苏大学医教协同创新基金项目(JDY2022007)镇江市社会发展项目(SH2019071)江苏省老年健康科研项目(LD2021039)
论文发表日期：2023-06-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 629-633 )
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