微小RNA-195-5p靶向SMAD同源物7调控转化生长因子β1影响心房颤动大鼠心肌纤维化
杨爱玲
林玲
申明月
后梅
苏蓉
张浒
李云飞
650031 昆明医科大学第一附属医院心脏内科
摘要：目的 探究微小 RNA-195-5p(microRNA-195-5p,miR-195-5p)对心房颤动(atrial fibrillation,AF)大鼠心肌纤维化的影响与机制.方法 选择雄性SD大鼠72只,随机分为对照组、AF组、阴性对照组、miR-195-5p组(miR-195-5p 抑制剂)、9 型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus serotype 9,rAAV9)组(miR-195-5p抑制剂+rAAV9-阴性对照)、联合组[miR-195-5p抑制剂+rAAV9-小干扰RNA-SMAD同源物(SMAD homolog,Smad)7,每组12只.除对照组外,其他组大鼠构建AF模型.给予对应干预措施后,进行心电图测试,记录AF发生率和持续时间;HE染色检测心肌组织病理变化;Masson染色检测心肌组织纤维化程度;实时荧光定量聚合酶链反应检测心肌组织 miR-195-5p、Smad7 mRNA表达;Western blot检测心肌组织转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad2、磷酸化 Smad2、Smad3、磷酸化 Smad3、Smad7、Ⅰ 型胶原蛋白(Collagen-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen-Ⅲ)表达;双荧光素酶实验验证miR-195-5p对Smad7的调控作用.结果 与对照组比较,AF 组 AF 发生率(75.0％vs 0)和持续时间[(27.02±2.65)s vs 0 s]、胶原容积分数[(14.47±0.89)％vs(2.12±0.35)％]、心肌组织 miR-195-5p(3.27±0.21 vs 1.00±0.10)、TGF-β1(0.76±0.08 vs 0.23±0.04)、Collagen-Ⅰ(0.58±0.07 vs 0.20±0.04)、Collagen-Ⅲ(0.46±0.05 vs 0.11±0.02)、磷酸化 Smad2/Smad2(0.92±0.10 vs 0.37±0.05)、磷酸化 Smad3/Smad3(0.65±0.06 vs 0.14±0.03)表达明显升高,Smad7 mRNA(0.32±0.06 vs 1.02±0.09)和Smad7(0.19±0.03 vs 0.58±0.07)表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);与AF组和阴性对照组比较,miR-195-5p组AF发生率和持续时间、胶原容积分数、心肌组织miR-195-5p、TGF-β1、Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ、磷酸化Smad2/Smad2和磷酸化Smad3/Smad3表达明显降低,Smad7 mRNA和蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与miR-195-5p组和rAAV9组比较,联合组AF发生率和持续时间、胶原容积分数、心肌组织TGF-β1、Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ、磷酸化 Smad2/Smad2 和磷酸化 Smad3/Smad3 表达明显升高,Smad7 mRNA 和 Smad7表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 下调miR-195-5p可能靶向Smad7抑制TGF-β1信号传导,从而减轻AF心肌纤维化.
关键词：心房颤动大鼠循环微RNA转化生长因子βSmad蛋白质类心肌纤维化微小RNA-195-5p
资助基金：云南省科技厅科技计划项目(202201AY070001-067)
论文发表日期：2025-01-14
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 27-32 )
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