抗人精浆磷脂酶A2单克隆抗体细胞株的建立与鉴定
王书奎1
黄宇烽2
夏欣一2
李保仝2
王自正3
刘猛六4
1.南京军区南京总医院生殖遗传研究室,江苏南京,210002;南京医科大学附属南京第一医院2.南京军区南京总医院生殖遗传研究室,江苏南京,2100023.南京医科大学附属南京第一医院4.中国药科大学生物化学研究所,江苏南京,210009
摘要：目的:制备并鉴定人精浆磷脂酶A2(PLA2)的单克隆抗体(McAb). 方法:通过PEG沉淀、Sephacryl S-300柱层析、DEAE-Sephadex A-25柱层析及羟基磷灰石(HA)柱层析分离纯化人精浆中的PLA2,并以SDS-PAGE鉴定其分子量及蛋白浓度;免疫BALB/C小鼠制备抗PLA2 McAb,通过ELISA技术、Western-Blot方法鉴定其敏感性及特异性. 结果:从精浆中提纯的PLA2的相对分子质量(Mr)约为34 900,纯化倍数约为245倍.制备的McAb经鼠Ig亚类分析为IgM Kappa型,敏感性可达1∶ 56～1∶ 58,Western-Blot证明其特异结合的抗原即为PLA2蛋白酶.结论:Mr为34 900的PLA2可能为一种新型PLA2.该PLA2的McAb的制备将为研究人精浆中PLA2与男性生殖能力的关系提供广阔的前景.
关键词：磷脂酶A2纯化单克隆抗体鉴定人精浆
分类号：Q556(酶)R397-33(基础医学)
资助基金：江苏省自然科学基金(BK95094312)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 173-177 )
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