人精子表面蛋白P34H的基因克隆及其在睾丸和附睾中表达分析
夏欣一1
许晓风1
高云2
黄宇烽2
1.南京师范大学生命科学学院,江苏,南京,2100972.南京军区南京总医院生殖遗传研究室,江苏,南京,210002
摘要:目的:克隆精子表面蛋白P34H基因的编码区,为进一步体外表达P34H蛋白做准备.方法:提取人附睾体部总RNA,并以此为模板,进行反转录PCR获得编码P34H蛋白的基因片段.应用T/A克隆策略,将扩增的P34H基因编码区克隆入T载体,并通过双酶切和DNA测序进行鉴定.同时,以β-actin为内参照物,进行反转录PCR半定量分析,比较P34H在附睾头部、体部和尾部及睾丸组织中的表达量.结果:成功地克隆了P34H基因.将P34H的cDNA序列登录GenBank,登录号为AF515625.反转录PCR半定量分析表明P34H主要在附睾体部表达.结论:克隆的P34H基因可用于构建表达载体.
关键词:精子表面蛋白P34HT/A克隆反转录PCR
分类号:R321.1(人体形态学)R339.2(人体生理学)
论文发表日期:2003-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 24-27 )
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