小鼠乳酸脱氢酶C亚基在大肠埃希菌中的表达与鉴定
熊永忠
郑德柱
谢飞
涂向东
兰风华
1.南京军区福州总医院实验科,福建,福州,3500252.南京军区福州总医院实验科,福建,福州,3500253.南京军区福州总医院实验科,福建,福州,3500254.南京军区福州总医院实验科,福建,福州,3500255.南京军区福州总医院实验科,福建,福州,350025
摘要：目的:构建小鼠特异性乳酸脱氢酶(LDH)C亚基的原核重组载体并进行表达和鉴定.方法:提取小鼠睾丸总RNA,逆转录合成cDNA,自行设计引物,PCR扩增小鼠LDH-C亚基编码序列,PCR产物经BamH I/EcoR I双酶切后,克隆至谷胱甘肽S转移酶(GST)融合表达载体pGEX-2T中,在E.co? BL21中诱导GST融合蛋白的表达.结果:在异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下,重组菌高效表达出一个相对分子质量约为60 000的产物.对重组质粒的序列分析表明,插入片段的序列与GenBank登录的编码序列完全一致.结论:小鼠LDH-C亚基的全长编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-2T,并在E.coli BL21中获得高表达.
关键词：乳酸脱氢酶C亚基精子克隆基因表达小鼠
分类号：R392.11(医学免疫学)R169.41(生殖健康与卫生)Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：福建省科技攻关项目(2002Y032)军队医药卫生科研项目(01MA032)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 9-11 )
英文信息