人精原干细胞的磁式分选和功能鉴定
李彦锋1
郭应禄2
李晓红3
靳风烁4
江军4
毕罡4
1.第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,重庆,400042;北京大学泌尿外科研究所,北京1000342.北京大学泌尿外科研究所,北京,1000343.北京大学第一医院生殖和遗传医疗中心,北京,1000344.第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,重庆,400042
摘要：目的: 目前对人睾丸内精原干细胞(SSC)的生物学本质特性尚缺乏深入研究.本研究旨在寻求人SSC的特异性表面标志以及对其进行有效分选和功能鉴定的合理方法.方法: 应用α6、β1整合素、Thy-1(CD90)和c-kit作为人SSC标志,利用免疫磁珠分选技术对成人睾丸单细胞悬液进行多参数复合分选,并利用流式细胞仪对分选后细胞的光散射特性和DNA倍体特性进行检测;将人分选后生殖细胞进行显微注射移植,观察人SSC在裸鼠睾丸内克隆形成的数量及其精子发生的可能性,对上述分选后人SSC进行功能性评价.结果: 分选后α+6 Thy-1+c-kit-和β+1Thy-1+c-kit-细胞均为大小、形态特征较为均一的细胞亚群,分别占分离细胞总数的2%～3%和 0.5%～1%.其光散射特性分析显示均为明显低侧向散射特征.DNA倍体分析显示明显DNA倍体组成改变,合成期和四倍体细胞消失,仅有单倍体、二倍体和减数分裂期细胞,α+6 Thy-1+c-kit-细胞群中,二倍体细胞数提高至该细胞群的 51.2%.功能性评价结果表明,分选后α+6 Thy-1+c-kit-细胞中干细胞浓度富积约40倍,β+1Thy-1+c-kit-细胞中干细胞浓度富积约20倍.结论: α6,β1 整合素和Thy-1可作为阳性标志用于人SSC的分选.应用上述标志的复合免疫磁珠分选可获得人SSC的明显富积,这将为深入研究SSC生物学和男性不育治疗开辟广阔前景.
关键词：精原干细胞睾丸移植人类
分类号：R339.2+1(人体生理学)
资助基金：国家自然科学基金(30200093)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 567-571 )
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