富集低丰度蛋白的人类精子全蛋白二维电泳整合图的建立
孙波澜
范立青
李凌伟
朱文兵
卢光琇
1.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,4100782.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,4100783.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,4100784.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,4100785.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,410078
摘要：目的: 运用二维电泳(2-DE)技术分离人类正常精子低丰度蛋白并建立全精子蛋白的2-DE整合图. 方法: 30例精子标本混匀后一次性进行蛋白提取,分别使用0.8、0.6、0.5、0.3 mg的蛋白上样量进行2-DE.运用MALDI-TOF法对确定2个恒定蛋白点的等位点(PI)和相对分子质量(Mr)作为图像的内参照点,对不同上样量的2-DE图进行比较分析,最后合成1张富集低丰度蛋白的整合图. 结果: 在0.5 mg图中分离出(1 080±23)个蛋白点,并合成具889个匹配点的整合图A.在上样量为0.8、0.6及0.3 mg的2-DE图中,分别新检测到381、50、32个在0.5 mg图中未检测到的蛋白点.最后合成具1 352个蛋白点的整合图B. 结论: 通过改变上样量的方法促进低丰度蛋白分离并合成具1 352个蛋白点富集低丰度蛋白的2-DE整合图.
关键词：全精子蛋白上样量低丰度蛋白二维电泳整合图
分类号：R321.1(人体形态学)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(30170480)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 295-299 )
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